<培養細胞>

　　培養細胞總是會讓科研小白茶飯(fan)不(bu)思，擔驚受(shou)怕，即使大好春光(guang)出去陪美眉(mei)或者小哥哥，也會牽腸掛(gua)肚(du)，心(xin)不(bu)在焉(yan)。

　　萬一污染(ran)了(le)又要看(kan)到師兄師姐鄙視的(de)目光，嫌棄的(de)嘴(zui)角(jiao)，還有因為(wei)污染(ran)造成其他戰友的(de)驚恐(kong)不安，想想都怕怕。

　　師(shi)姐A：師(shi)妹！！！讓你(ni)養(yang)著玩的細胞又污染了(le)。

　　師(shi)姐B：納(na)尼？！

　　師姐(jie)C（火速趕往案發現(xian)場）：我的心肝寶貝細(xi)胞(bao)你還好么？

　　師兄A:天啊！！！并致電女(nv)票：“親愛(ai)的，晚上不能陪你了(le)(le)，新來的師妹細胞又污(wu)染了(le)(le)，我又要給(gei)培養箱滅菌了(le)(le)”。

　　師妹：我是罪人，好丟臉(lian)。像我這樣(yang)的小白如(ru)何避免細胞污染呢？

　　“師(shi)妹過來，師(shi)兄手把手教你，如何預防細(xi)胞污(wu)染。” 想當年師(shi)兄就是靠養細(xi)胞培養起來的重(zhong)度(du)潔癖。

　　常規(gui)操作(zuo)不再贅述，主要(yao)安利以下內容：

　　1. 仔細(xi)閱讀(du)所在實驗室的細(xi)胞(bao)室綜合管理(li)制度，嚴(yan)格遵(zun)守制度。

　　2. 細胞室(shi)室(shi)內(nei)滅菌可(ke)以交叉進(jin)行，熏蒸、臭氧、紫外(wai)、新潔爾滅。

　　3. 根據細胞室空間，限(xian)制同時進入人數。

　　4. 超(chao)凈(jing)(jing)工作(zuo)臺(tai)使用(yong)(yong)前(qian)后(hou)，紫外燈照射滅菌。使用(yong)(yong)前(qian)、后(hou)需用(yong)(yong)酒精棉球擦(ca)(ca)拭(shi)工作(zuo)區消(xiao)毒(du)（小(xiao)竅門(men)：超(chao)凈(jing)(jing)臺(tai)使用(yong)(yong)完畢后(hou)，可(ke)以用(yong)(yong)酒精噴灑(sa)(sa)桌面(mian)，再用(yong)(yong)抽紙(zhi)擦(ca)(ca)干凈(jing)(jing)，比用(yong)(yong)酒精棉球干凈(jing)(jing)多(duo)(duo)嘍！使用(yong)(yong)前(qian)不(bu)建議這種方法(fa)擦(ca)(ca)拭(shi)）。物(wu)品(pin)放入超(chao)凈(jing)(jing)臺(tai)前(qian)均應酒精噴灑(sa)(sa)消(xiao)毒(du)，超(chao)凈(jing)(jing)臺(tai)內嚴禁堆放過(guo)多(duo)(duo)物(wu)品(pin)，以免影響風路平衡。

　　5. 水浴鍋使用完畢后及時將水倒掉，并保持鍋內干燥。常用水浴鍋時，每周將水浴鍋中的水至少煮沸一次，以防細菌滋生。

　　6. 從(cong)培養(yang)箱取(qu)放(fang)細(xi)胞前，用酒(jiu)精清潔雙手(shou)（或手(shou)套），盡量縮(suo)短開門時間和減少開門次數。培養(yang)瓶放(fang)入培養(yang)箱前，用酒(jiu)精消毒表(biao)面(mian)，并稍等至酒(jiu)精揮發后再放(fang)入，以免培養(yang)箱內滯(zhi)留過多乙醇蒸氣。

　　7. 培養箱用(yong)水每周更換一次(ci)，更換前托盤(pan)用(yong)酒(jiu)精擦拭、紫(zi)外(wai)燈(deng)照射30分(fen)鐘殺菌。

　　8. 滅完菌(jun)槍(qiang)頭，烘箱烘干后(hou)存(cun)放，保質期1周。逾期需重新滅菌(jun)使用。

　　9. 培養液、胰酶、PBS等(deng)試劑(ji)盡量不和別人(ren)共用(yong)，應單獨分裝使用(yong)，以免(mian)交叉污(wu)染，也便污(wu)染后自查原因。

　　10.在(zai)使(shi)用(yong)0.22μm的(de)微(wei)孔(kong)濾(lv)膜(mo)過濾(lv)自配(pei)溶液時，注意無菌操作規范，以防濾(lv)液污染。特殊情況可檢菌安全后(hou)使(shi)用(yong)。

　　11.除(chu)特殊要求外，建(jian)議培養基中(zhong)添加雙抗，算是(shi)送給細胞的(de)守護(hu)神。

　　12.防護服、口罩、手套缺一不可。隔壁細(xi)胞室負責人是韓(han)國回(hui)來(lai)的(de)博士，讓學生只戴(dai)手套操(cao)作(zuo)，于是經常聽(ting)他們說細(xi)胞掛了。

　　13.操作前，準備好所有(you)實驗所需物品，以減少走動；物品需有(you)序擺(bai)放在超凈臺觸(chu)手(shou)可及的(de)地方(fang)，同(tong)時空(kong)留足夠(gou)操作空(kong)間。

　　14.操(cao)(cao)作時，試劑不用(yong)盡(jin)量(liang)及時蓋(gai)上蓋(gai)子，移(yi)至操(cao)(cao)作區外圍，盡(jin)量(liang)不要(yao)從(cong)開口(kou)容(rong)器上經過。

　　15.使用移液槍(qiang)時，將容器傾斜以(yi)便于移液，切勿(wu)將槍(qiang)桿碰觸瓶口(kou)及內壁。一旦發(fa)生(sheng)倒(dao)吸(xi)情況，要及時用酒精棉球擦拭(shi)，以(yi)免液體殘(can)留導致細菌滋生(sheng)。

　　16.先取試劑、耗材，再(zai)取移液槍、安槍頭。很多人(ren)習(xi)慣先安槍頭，然后去拿試劑、耗材，殊不知無(wu)意間槍頭已經觸(chu)碰其他(ta)地方(fang)導致污染(ran)。

　　17.向廢液(ye)缸(gang)(gang)打廢液(ye)時，需輕柔，以免(mian)造(zao)成(cheng)水花(hua)四(si)濺(jian)，污染槍頭(tou)、槍體。實驗結束，及時倒掉廢液(ye)缸(gang)(gang)垃圾，沖(chong)洗(xi)之后噴灑酒精，放入超凈臺紫外照射殺菌(jun)。

　　18.培養(yang)基滴在桌面時要及時用酒精棉球(qiu)擦拭，切記(ji)不要等實(shi)驗做完再處理(li)。因為那樣，你的(de)臺面上就會留下一個印記(ji)，對于強迫癥的(de)人來說，不！能！接！受！！！！

　　19.凍(dong)存細胞時(shi)凍(dong)存管(guan)蓋(gai)子需擰(ning)(ning)緊(jin)(jin)。復蘇(su)細胞時(shi)，從液氮(dan)罐取出凍(dong)存管(guan)，輕擰(ning)(ning)蓋(gai)子，以(yi)確(que)認蓋(gai)子是否(fou)擰(ning)(ning)緊(jin)(jin)。鑷子夾住凍(dong)存管(guan)蓋(gai)子與管(guan)體交(jiao)界處，在37度水浴鍋中快速(su)解凍(dong)，水面不可超過凍(dong)存管(guan)蓋(gai)沿；不建議直接扔進(jin)水中，以(yi)免水滲入造成污(wu)染。

　　20.一旦污(wu)染，及時處理，不(bu)到(dao)不(bu)得(de)已不(bu)建(jian)議施救；查找原因，防止再犯(fan)。

　　總的(de)(de)(de)來說，防患未然(ran)比亡羊補(bu)牢強得多。操(cao)作過程中對于模(mo)糊(hu)不清的(de)(de)(de)，寧愿認為(wei)是有菌的(de)(de)(de)棄掉，也不要心存僥(jiao)幸！